Али Найманов
А.Х. Найманов, В.И. Косенко, О.В.Якушева
Из практических наблюдений и литературных источников известно, что при введении здоровых животных в неблагополучное по туберкулезу стадо здоровые животные быстро заболевают. Многими авторами установлено, что аллергический ответ на заражение возникает не сразу, а спустя некоторое время после внедрения в организм микобактерий, которое колеблется от 5 до 90 суток. Однако в литературе мы не обнаружили данных о времени выявления туберкулезных изменений у завезенного здорового скота, динамики проявления аллергических реакций и выявления гуморальных антител серологическими реакциями у этих животных. Следует отметить, что все указанные вопросы являются весьма сложными и на них практически невозможно дать однозначные ответы, так как динамика проявления аллергических реакций, сроки выявления гуморальных антител и особенно время, необходимое для развития характерных для туберкулеза изменений у зараженных животных, зависят от многочисленных факторов внешней среды, индивидуальных особенностей каждого организма, вирулентности возбудителя туберкулеза, условий кормления, содержания и т.д. Вместе с тем, выяснение указанных вопросов, особенно установление примерного времени, необходимого для развития видимых и характерных для туберкулеза изменений у зараженного скота, является весьма актуальным в повседневной работе практических ветеринарных специалистов при установлении причины возникновения этой болезни у завезенного поголовья скота. Особенно важно это при так называемых «острых вспышках» данного хронического заболевания среди всего поголовья и при повторном возникновении туберкулеза в оздоровленных хозяйствах. В связи с этим была поставлена задача – выяснить время, необходимое для развития характерных для туберкулеза изменений у естественно и искусственно зараженного крупного рогатого скота.
Материалы и методы
В длительно неблагополучное по туберкулезу хозяйстве с большим (83,7%) процентом зараженности скота завезли 12 здоровых шестимесячных бычков из одного благополучного хозяйства другого региона страны. После месячной акклиматизации в новых условиях бычки были исследованы аллергической пробой и помещены среди больного туберкулезом скота. Одновременно были проведены аллергические исследования поголовья этой фермы. В последующем завезенных бычков через каждые 45 – 60 суток исследовали аллергическим и серологическим методами. Аллергические исследования проводили внутрикожным введением ППД-туберкулина для млекопитающих, серологические – РСК и PH ГА.
Через год после начала опыта по заражению всех подопытных животных убили. Провели патологоанатомические, гистологические, бактериологические и биологические исследования на туберкулез. На экспериментальную базу завезли 36 бычков из благополучных хозяйств. Всех животных исследовали аллергической пробой, а сыворотки крови от них серологически – РСК с КТА УНИИЭВ и СибНИВИ. В возрасте 11 – 13 месяцев бычков заразили культурами микобактерий туберкулеза бычьего вида (шт. ЦВ-1) алиментарно в дозе 0,2 мг на 1 кг живой массы животного, путем четырехкратного вливания культуры с водой через зонд трехкратно три дня подряд – каждый день. Кроме этого, четвертый раз – через 7 суток. Через каждые 40 – 60 суток после заражения животных исследовали аллергической пробой, а сыворотки крови – РСК.
Через восемь месяцев после заражения животные были убиты. Проведены патологоанатомические, гистологические, бактериологические и биологические исследования на туберкулез. Бактериологические исследования провели с использованием двух сред (Л-Йенсена, Финн-2). Объектом исследования служил патологический материал от 44 убитых животных. Биологические исследования провели на 147 морских свинках. Заражение морских свинок проводили подкожным и интратестикулярным методом введения суспензии материала.
Результаты исследований
Исследования естественно зараженных животных. При аллергическом исследовании ППД-туберкулином для млекопитающих 172 коров фермы передержки больного туберкулезом скота реагировало 144 (83,7%) животных. При убое двух реагирующих на туберкулин коров этой фермы в обеих случаях обнаружили характерные для болезни изменения. В эту группу скота поместили подопытных бычков. При аллергическом исследовании 12 завезенных бычков (в ноябре перед постановкой животных на контакт по заражению) реагирующих не выявили В дальнейшем бычков исследовали ППД-туберкулином для млекопитающих в течение года пять раз (в марте, апреле, июне, сентябре, ноябре). В эти же сроки брали пробы крови для серологических исследований на туберкулез. Результаты аллергических исследований, послеубойного осмотра и лабораторных исследований представлены в таблице. Из нее видно, что из 12 бычков через четыре месяца (в марте) после помещения среди больных животных реагировало на туберкулин 66,7% исследованных особей, с интенсивностью аллергических реакций от 4 до 22 мм. Через пять месяцев (в апреле) реагировало 75,0% исследованных животных с интенсивностью реакций от 4 до 10 мм. Проведен вынужденный убой бычка N 5300, реагирующего на туберкулин утолщением кожной складки в 6 мм. При патологоанатомическом осмотре свойственных туберкулезу изменений не обнаружили, лабораторные исследования (гистологическое, бактериологическое и биологическое) также не подтвердили наличие туберкулеза у этого бычка. Через восемь месяцев (июнь) реагировало семь (63,6%) животных, с интенсивностью реакций от 3 до 18 мм. Через 10 месяцев (сентябрь) реагировало шесть (54,6%) животных, с интенсивностью реакций от 4 до 20 мм. Через 12 месяцев (ноябрь) реагировало семь (63,6%) животных, с интенсивностью реакций от 4 до 12 мм. Проведенные аллергические исследования (шесть раз в течение года) показывают, что наибольшее количество (75,0%) реагирующих животных было выявлено через пять месяцев после контакта с больными коровами. Кроме того, установлено, что у некоторых зараженных туберкулезом животных аллергические реакции могут выпадать, затем появляться вновь, хотя, в основном, больные особи стабильно реагируют на внутрикожное введение туберкулина. При серологических исследованиях сывороток крови бычков получили следующие данные. До постановки КРС на контакт по заражению – отрицательные результаты. В дальнейшем положительные показания в РНГА были с сыворотками от всех животных, но в небольших титрах, за исключением двух бычков, у которых в июне показания РИГА были отрицательными. К сентябрю (10 месяцев) титры РНГА увеличились до 1:40 у трех бычков (NN 5246, 5298, 5297). Через четыре месяца после контакта положительные показания РСК были у трех 6ычков: N 5249 – 1:160, N 5300 – 1:40, N 5298 – 1:40. При дальнейших исследованиях положительные показания РСК сохранились у двух бычков (N 5249, 5298). Через пять месяцев положительные показания РСК установили у бычка N 5296, через восемь месяцев – у двух бычков N 5249, 5298. Через 10 месяцев – у трех бычков N 5249, 5250, 5298. Через год после постановки животных на контакт по заражению бычков убили. При патологоанатомическом осмотре 11 особей характерные для туберкулеза изменения обнаружили в семи (63,6%) случаях. У одного реагирующего на туберкулин бычка в бронхиальном лимфатическом узле обнаружили узелок величиной с просяное зерно с гнойным содержанием. При гистологическом и бактериологическим исследовании патматериала от этого быка туберкулез не подтвердили, а при биологическом исследовании морские свинки пали с характерными для туберкулеза изменениями. При бактериологическом исследовании материала от павших морских свинок выделили культуру M. bovis. Биологические исследования материала также подтвердили туберкулез в семи (63,6%) случаях, в том числе в одном случае, где мы не обнаружили характерных изменений. Однако в одном случае при наличии характерных изменений биопроба дала отрицательные показания.
Всего проведенным комплексом исследований туберкулез подтвержден в восьми случаях. Следует отметить, что в этом хозяйстве в конце опыта нами проведен убой 243 голов крупного рогатого скота (114 коров и 129 телок). При этом при убое коров туберкулезные изменения обнаружили у 61 (53,5%), при убое 129 телок у четырех (3,1 %) убитых животных.
Исследование искусственно зараженных бычков. При аллергических и серологических исследованиях 36 бычков до заражения были получены отрицательные результаты. Через 33 суток после последнего заражения пал один бычок N 8407, с диагнозом травматический ретикулоперитонит. При бактериологическом исследовании материала от этого животного выделена культура микобактерий бычьего вида. Через 50 суток после заражения (в мае) при аллергическом исследовании 35 бычков реагировало 34 (кроме одного бычка N 3992), с большой интенсивностью реакции 10,9Ѓ+1,2 мм. Через 105 суток (в нюне) реагировало 24 (68,6%) животных, с интенсивностью реакции 6,7+0,7 мм. В августе пал бычок N 5407. При патологоанатомическом исследовании этого бычка обнаружили подобные для туберкулеза изменения в подчелюстном и заглоточном лимфоузлах. Однако при проведении гистологических, бактериологических и биологических исследований материала от этого бычка получили отрицательные результаты.
Результаты исследования естественно зараженных бычков
Инв. |
Реакция в мм по месяцам |
Обнаружен туберкулез |
результаты
|
||||||
Ноябрь |
Март |
апрель |
июнь |
сентябрь |
ноябрь |
Гистологические |
Бактериологические, биопробы |
||
5300 |
— |
6 |
6 |
Вынужденный убой |
— |
— |
— |
||
5796 |
— |
20 |
16 |
11 |
5 |
— |
В легких, бронхиальном, средостенном лимфоузле |
+ |
+ |
5249 |
— |
16 |
18 |
3 |
— |
6 |
Гнойник в бронхиальном лимфоузле |
— |
+ |
5295 |
— |
— |
— |
— |
— |
8 |
— |
— |
— |
5246 |
— |
10 |
4 |
5 |
12 |
6 |
В подчелюстном, бронхиальном лимфоузле |
+ |
+ |
5297 |
— |
6 |
10 |
3 |
4 |
4 |
В бронхиальном лимфоузле |
+ |
+ |
5293 |
— |
— |
— |
— |
— |
— |
— |
— |
— |
5250 |
— |
— |
11 |
8 |
4 |
12 |
В средостенном лимфоузле |
+ |
+ |
5298 |
— |
4 |
18 |
18 |
16 |
— |
В бронхиальном лимфоузле |
+ |
— |
5248 |
— |
12 |
8 |
5 |
— |
8 |
В средостенном лимфоузле |
+ |
+ |
5294 |
— |
14 |
6 |
— |
20 |
12 |
В легких, бронхиальном, средостенном лимфоузле |
+ |
+ |
5247 |
— |
— |
— |
— |
— |
— |
— |
— |
— |
всего |
— |
8(66,7%) |
9(75,0%) |
7 (63,6) |
6 (54,6) |
7(63,6) |
7(63,6) |
7(63,6) |
7(63,6) |
В сентябре вынужденно убили бычка N 0188. При патологоанатомическом осмотре не обнаружили характерных для туберкулеза изменений, а при бактериологическом и биологическом исследовании материала выделили культуру микобактерий бычьего вида. Через 200 суток после заражения при аллергическом исследовании реагировало 22 (66,7%) особи, интенсивность реакции резко снизилась. Через восемь месяцев реакции у большинства зараженных животных выпали (реагировало увеличением толщины кожной складки на 3–4 мм семь бычков). При серологическом исследовании сывороток крови через 50 дней после заражения положительные показания в РСК с КТА и СибНИВИ получили в одном случае (бычок N 110, который реагировал и по аллергической пробе). Через 105 дней положительные показания РСК с КТА УНИИЭВ и СибНИВИ были: с КТА УНИИЭВ – у двух бычков (N 5469, 0188, которые реагировали и по аллергической пробе), с СибНИВИ – у одного бычка (N 7484, реагировал по аллергической пробе). Всего положительные показания по РСК установлены у четырех бычков (N0110, 5469, 0188, 7484). Через восемь месяцев после заражения убили 33 бычков. При послеубойном осмотре у 11 животных в заглоточных лимфоузлах, а также в легких и печени обнаружили подобные для туберкулеза изменения. При гистологическом исследовании материала от убитых животных на туберкулез получен отрицательный результат (подобные для туберкулеза изменения при гистологическом исследовании оказались актиномикозного характера). При последующем бактериологическом и биологическом исследовании материала от убитых животных диагноз на туберкулез подтвержден у 15 особей. Из них бактериологическим исследованием в девяти случаях выделена культура M.bovis, биопробой – в 11 случаях, а бактериологическим исследованием патматериала от морских свинок культура M. bovis выделена в 10 случаях. Представленные результаты лабораторных исследований показывают, что наибольшая количество подтверждений случаев туберкулеза получено при биологическом исследовании.
Заключение
При искусственном и естественном заражении туберкулезом крупного рогатого скота выявление реагирующих животных при аллергических исследованиях, а также положительные показания при серологических исследованиях не всегда является признаком наличия у них характерных для болезни изменений. При естественном заражении крупного рогатого скота характерные для туберкулеза изменения у большинства (63,6%) инфицированных животных появляются через год после ввода здоровых особей в неблагополучное по туберкулезу стадо. При искусственном заражении туберкулезом бычков и убое их через восемь месяцев после заражения характерные для туберкулеза изменения не обнаружены ни у одного животного. При бактериологическом и биологическом исследовании материала от убитых бычков выделена исходная культура M. bovis, а у зараженных этой культурой морских свинок развился генерализованный туберкулез.