Диагностическая ценность прижизненных методов диагностики туберкулеза КРС, используемых в широкой ветеринарной практике
Али Найманов
В настоящее время мероприятия по профилактике и борьбе с туберкулезом животных в Российской Федерации проводятся в соответствии с санитарными и ветеринарными правилами «Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных», утвержденных Госкомсанэпиднадзором и Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 18 июня 1996 г., и «Наставлением по диагностике туберкулеза животных», утвержденного Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 18 ноября 2002 г.
В соответствии с этими нормативными документами, основным методом прижизненной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота является внутрикожная туберкулиновая проба. В качестве дополнительных методов диагностики применяют глазную пробу, пальпебральную пробу, внутривенную пробу, симультанную пробу с ППД-туберкулином для млекопитающих и комплексным аллергеном из атипичных микобактерий (КАМ), а также симультанную пробу с ППД-туберкулином для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц.
В соответствии с «Наставлением по диагностике туберкулеза животных», глазной метод туберкулинизации применяют у крупного рогатого скота только одновременно с внутрикожной пробой в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах для дополнительного выявления зараженных животных. Глазную пробу также можно использовать одновременно с внутрикожной пробой при отборе особей для диагностического убоя.
Пальпебральный метод туберкулинизации применяют одновременно с внутрикожной пробой для дифференциации неспецифических реакций на туберкулин.
Внутривенную туберкулиновую пробу применяют с целью отбора животных для диагностического убоя из числа реагирующих на туберкулин в благополучных по туберкулезу стадах.
Симультанную пробу с туберкулинами для млекопитающих и для птиц применяют для дифференциации неспецифических реакций у крупного рогатого скота и свиней при первичной постановке диагноза и для контроля за благополучием животных по туберкулезу в стадах, где реакции на туберкулин обусловлены сенсибилизацией, микобактериями комплекса авиум-интрацеллюляре или атипичными микобактериями.
Симультанную пробу с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ применяют для диагностики туберкулеза КРС при первичной постановке диагноза, а также для контроля за благополучием хозяйств, где реакции на туберкулин обусловлены сенсибилизацией животных атипичными микобактериями.
Целью проведенных нами исследований является сравнительное изучение и определение диагностической ценности утвержденных методов прижизненной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота, используемых в ветеринарной практике нашей страны.
Материалы и методы
При сравнительном изучении различных диагностических тестов аллергические исследования проводили в соответствии с утвержденными методиками, представленными в «Наставлении по диагностике туберкулеза животных» от 2002 года.
Сравнительное изучение внутрикожной и глазной пробы провели на 1064 головах крупного рогатого скота из четырех длительно неблагополучных по туберкулезу хозяйствах. Провели убой 62 исследованных животных.
Сравнительное изучение внутрикожной и пальпебральной пробы провели на 35 экспериментально зараженных M. bovis телках, на 136 головах крупного рогатого скота в одном благополучном хозяйстве, на 2 917 особях КРС из семи благополучных хозяйств, где была установлена сенсибилизация животных нетуберкулезными микобактериями, и на 2 468 головах крупного рогатого скота из семи неблагополучных по туберкулезу хозяйств. Провели убой 148 исследованных животных.
Сравнительное изучение внутрикожной и внутривенной туберкулиновых проб провели на 18 здоровых животных в одном благополучном хозяйстве, на 33 экспериментально зараженных M. bovis телках, на 53 реагировавших на туберкулин животных благополучных хозяйств, где была установлена сенсибилизация животных нетуберкулезными микобактериями, на 49 головах крупного рогатого скота, реагировавших на внутрикожное введение туберкулина в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах. Провели убой десяти исследованных животных.
Диагностическую ценность симультанной пробы с ППД-туберкулином для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц изучали на 516 головах КРС двух благополучных хозяйств, где установлена сенсибилизация животных микобактериями комплекса авиум-интрацеллюляре, на 5 504 головах крупного рогатого скота четырех благополучных хозяйств, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулезными (атипичными) микобактериями III и IV гр. по классификации Раньена.
Диагностическую ценность симультанной пробы с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ изучали на 355 головах крупного рогатого скота в одном благополучном хозяйстве, где установлена сенсибилизация животных микобактериями комплекса авиум-интрацеллюляре, на 11 467 головах КРС из 20 благополучных хозяйств, где была установлена сенсибилизация животных нетуберкулезными микобактериями III и IV гр. по классификации Раньена.
Результаты исследований и обсуждение
Диагностическая ценность глазной туберкулиновой пробы
Сравнительное изучение диагностической ценности внутрикожной и глазной туберкулиновых проб мы провели в четырех длительно неблагополучных по туберкулезу хозяйствах на 1064 головах крупного рогатого скота.
В первом хозяйстве при исследовании 100 голов КРС реагировали по группам: на однократное внутрикожное введение от 95% до 100% исследованных животных, на первое глазное введение туберкулина от 0 до 25%, на второе глазное введение – от 16,5% до 70% исследованных животных.
Во втором хозяйстве при исследовании 162 голов крупного рогатого скота реагировали по группам: на однократное внутрикожное введение от 85% до 100% животных, на первое глазное введение от 0% до 53,5%, на второе глазное введение от 18,5% до 90% исследованных.
В третьем хозяйстве при исследовании 262 голов КРС методами однократной внутрикожной и двойной глазной пробы (с интервалом между повторным глазным введением через шесть суток), на внутрикожное введение реагировало 251 (95,8%) животных, на первое глазное введение реагировало 35 (11,4%), на второе глазное введение реагировало 130 (49,6%) исследованных особей.
В четвертом хозяйстве при исследовании 270 голов крупного рогатого скота методами однократной внутрикожной пробы и двойной глазной пробы (с интервалом между повторным глазным введением в 72 часа) на внутрикожное введение реагировало 236 (87,4%), на первое глазное введение реагировало 57 (21,1%), на второе глазное введение реагировало 197 (72,9%) исследованных животных.
Итого в длительно неблагополучных по туберкулезу хозяйствах реагировало на внутрикожную пробу от 85% до 100% животных, на первое глазное введение реагировало от 0% до 53,5%, на второе глазное введение от 18,5% до 90,0% исследованных животных.
В целях выяснения подтверждаемости аллергических реакций на внутрикожное и глазное введение туберкулина провели убой 62 исследованных животных. Из числа убитых особей 58 (93,5%) реагировали на внутрикожное введение туберкулина, характерные для туберкулеза изменения обнаружены у 47 (81,0%) реагировавших животных. Не реагировали на внутрикожное введение четыре особи, у которых в двух случаях обнаружены характерные для туберкулеза изменения.
Из числа убитых животных 38 (61,3%) реагировали на глазное введение, характерные для туберкулеза изменения обнаружены у 32 (84,2%) реагировавших животных. Не реагировали на двукратное глазное введение туберкулина 24 особи, у которых в 17 (70,8%) случаях обнаружены характерные для болезни изменения.
Полученные результаты исследований показывают, что однократная внутрикожная проба намного чувствительнее, чем двукратная глазная проба. Так, глазная проба недовыявляет значительное количество (до 70,8%) больных животных. Кроме того, внутрикожная проба удобна и проста для использования, особенно при использовании безыгольных инъекторов.
Глазная проба трудоемка и длительна для исполнения. При применении усовершенствованного метода глазной пробы, на двукратное глазное введение туберкулина с интервалом в два дня (через 72 ч) несколько повышается чувствительность пробы, однако специфичность остается на низком уровне, т.е. также недовыявляются в большом количестве больные животные.
Поэтому, в настоящее время глазная проба не применяется при диагностике туберкулеза ни в одной стране мира. В нашей стране глазную пробу также практически не применяют. Иногда ее используют в благополучных хозяйствах в целях отбора животных для диагностического убоя.
Диагностическая ценность пальпебральной туберкулиновой пробы
Экспериментально зараженные туберкулезом бычки через полтора месяца после заражения реагировали на внутрикожную пробу в количестве 34 (97,1%) животных, с интенсивностью реакций 11,2+1,4 мм. Через два с половиной месяца после заражения, при исследовании этих особей внутрикожной и пальпебральной пробами, на внутрикожную пробу реагировало 24 (68,7%), а на пальпебральную – 22 (62,9%) бычка.
В благополучном по туберкулезу хозяйстве здоровые животные не реагировали на внутрикожное и пальпебральное введение ППД-туберкулина для млекопитающих.
В неблагополучных по данному заболеванию хозяйствах при исследовании 2 468 голов крупного рогатого скота выявлено 1008 (40,8%) реагирующих животных, из них 684 (67,9%) реагировали на обе пробы. Кроме того, выявлено 166 (16,4%) особей, реагировавших только на внутрикожное и 158 (15,7%) животных, реагировавших только на пальпебральное введение туберкулина. В целях подтверждения результатов аллергических исследований провели диагностический убой 148 реагирующих. При дальнейших патологоанатомических и лабораторных исследованиях туберкулез подтвердили у 118 (80,0%) реагировавших на внутрикожную пробу и 111 (75,0%) животных, реагировавших на пальпебральную пробу.
В благополучных по туберкулезу хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулезными микобактериями, получены следующие результаты исследований.
В хозяйстве 1, при исследовании 210 голов крупного рогатого скота, на внутрикожную пробу реагировало 14 (6,6%), на пальпебральную пробу – 4 (1,9%) исследованных животных.
В хозяйстве 2, при исследовании 350 голов крупного рогатого скота, на внутрикожную пробу реагировало 21 (6,0%) голова, на пальпебральную пробу реагирующих животных не выявили.
В хозяйстве 3, при исследовании 209 голов КРС на внутрикожную пробу, реагировало 14 (6,7%) животных, а на пальпебральную пробу выявили только одну (0,5%) реагирующую корову.
В хозяйстве 4, при исследовании 9100 голов крупного рогатого скота, на внутрикожное введение реагировало 14 (1,5%) животных, на пальпебральную пробу реагирующих не выявили.
В хозяйстве 5, при исследовании 356 голов крупного рогатого скота, на внутрикожную пробу реагировало 25 (7,0%), на пальпебральную пробу – реагирующих выявлено не было.
В хозяйстве 6, при исследовании 416 голов крупного рогатого скота, на внутрикожное введение реагировало 39 (9,4%) животных, на пальпебральное введение реагирующих не было.
В хозяйстве 7, при исследовании 466 голов КРС, на внутрикожное введение реагировало 31 (6,6%) особь, а на пальпебральное введение реагировало трое (0,6%) исследованных животных.
Итого в благополучных хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулезными микобактериями, при исследовании 2 917 голов крупного рогатого скота выявлено: на внутрикожную пробу – 158 (5,4%), а на пальпебральную пробу 8 (0,3%) реагирующих животных.
Полученные результаты исследований показывают, что в благополучных по туберкулезу хозяйствах здоровые животные не реагируют на внутрикожное и пальпебральное введения туберкулина, а экспериментально зараженные M. bovis телки и инфицированные животные в неблагополучных хозяйствах реагируют на внутрикожную пробу незначительно больше, чем на пальпебральную. В благополучных хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулезными микобактериями, на пальпебральную туберкулиновую пробу реагирующие животные не выявляются или выявляются в единичных (до 0,3%) случаях.
Диагностическая ценность внутривенной туберкулиновой пробы
В благополучном по туберкулезу хозяйстве установлено, что здоровые коровы не реагируют на внутрикожное и внутривенное введения туберкулина.
Из 33 экспериментально зараженных M.bovis телок реагировали: на внутрикожное введение туберкулина 32 (96,9%), на внутривенное – 14 (42,4%) животных. Причем положительную реакцию на внутривенную пробу наблюдали через шесть часов после введения у десяти телок и через девять часов еще у четырех телок.
В благополучных хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулезными микобактериями при переисследовании реагировавших на внутрикожное введение туберкулина внутривенной пробой реагирующих животных не выявили.
В неблагополучных по туберкулезу хозяйствах при исследовании 49 реагировавших на внутрикожную пробу животных, на внутривенную пробу выявили 18 (51,4%) особей (с повышением температуры тела на 10 и выше максимально нормальной температуры тела, т.е. выше 40,50).
При диагностическом убое десяти реагировавших на внутривенное введение туберкулина коров в шести (60,0%) случаях обнаружены характерные для туберкулеза изменения. Следует отметить, что все десять убитых коров реагировали и на внутрикожное введение туберкулина.
Полученные результаты исследований показывают, что здоровые и сенсибилизированные нетуберкулезными микобактериями животные из благополучных хозяйств не реагируют на внутривенное введение туберкулина. Экспериментально зараженные туберкулезом животные в 42,4% случаев, а больные туберкулезом – в 51,4% случаях дают положительные показания на внутривенное введение туберкулина, то есть внутривенная проба по чувствительности значительно уступает внутрикожной пробе. Кроме того, трудоемка для исполнения (в связи с необходимостью фиксации животных для внутривенного введения большой дозы туберкулина и необходимостью проведения неоднократного измерения температуры тела исследуемых).
Диагностическая ценность реакций симультанной пробы с использованием ППД-туберкулина для млекопитающих и ППД-туберкулина для птиц
Исследования в благополучных хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных микобактериями комплекса авиум-интрацеллюляре
В первом хозяйстве при исследовании 371 головы крупного рогатого скота выявлено 78 (21,0%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД для млекопитающих – (знак +) – 9, с меньшей реакцией (знак –) – 65, с равной реакцией (знак =) – 4. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на ППД-туберкулин для птиц.
Во втором хозяйстве при исследовании 145 голов крупного рогатого скота выявлено 46 (31,7%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД для млекопитающих – 14, с меньшей реакцией – 25, с равной реакцией – 7. Результат симультанной пробы неопределенный.
Исследования в благополучных хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными микобактериями III и IV гр. по классификации Раньена
В хозяйстве 1, при исследовании 111 голов крупного рогатого скота, выявлено 30 (27,0%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 16, с меньшей реакцией – 8, с равной реакцией – 6. Результат симультанной пробы неопределенный.
В хозяйстве 2, при исследовании 1 804 голов КРС, выявлено 60 (3,3%) реагирующих, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 27, с меньшей реакцией – 19, с равной реакцией – 14. Результат симультанной пробы неопределенный.
В хозяйстве 3, при исследовании 2 810 голов крупного рогатого скота, выявлено 95 (3,40%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 58, с меньшей реакцией – 21, с равной реакцией – 16. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на ППД-туберкулин для млекопитающих.
В хозяйстве 4, при исследовании 768 голов КРС, выявлено 97 (12,6%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 35, с меньшей реакцией – 32, с равной реакцией – 30. Результат симультанной пробы неопределенный.
Полученные результаты исследований показывают, что при применении симультанной пробы с ППД-туберкулином для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц лучшие дифференцирующие результаты получены в хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных микобактериями комплекса авиум-интрацеллюляре. В хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулезными микобактериями III и IV группы по классификации Раньена, получены неопределенные результаты, а в одном благополучном хозяйстве получен ошибочный результат исследований, т.е. по результатам симультанной пробы реакции были достоверно более выражены на ППД для млекопитающих.
Кроме того, следует отметить, что, в соответствии с «Наставлениями по диагностике туберкулеза животных» от 2002 г., результаты исследований на симультанную пробу с ППД для млекопитающих и ППД для птиц следует оценивать индивидуально или в целом по стаду. Однако в этом наставлении представлена только методика проведения индивидуального учета.
Следует указать, что в последние годы на территории нашей страны сенсибилизация крупного рогатого скота микобактериями туберкулеза птичьего вида встречается крайне редко. В основном устанавливают сенсибилизацию нетуберкулезными микобактериями III и IV группы по Раньену. Анализ бактериологических исследований, проведенных в лаборатории микобактериозов ВИЭВ, показывает, что из патматериала реагировавших на туберкулин и убитых с диагностической целью животных из благополучных хозяйств в большинстве случаев выделяются быстрорастущие нетуберкулезные микобактерии IV группы по классификации Раньена.
Отчетные данные производственных лабораторий также подтверждают данные наших исследований. Так, на территории Российской Федерации ветеринарные лаборатории выделяют от реагировавших на туберкулин животных нетуберкулезные микобактерии, которые в процентном соотношении распределяются следующим образом: 1 группа – 2%, 2 группа – 19,7%, 3 группа – 16,8%, 4 группа – 59,5%.
Диагностическая ценность симультанной пробы с использованием ППД-туберкулина для млекопитающих и КАМ
В хозяйстве, где была установлена сенсибилизация животных микобактериями комплекса авиум-интрацеллюляре, при исследовании 355 голов крупного рогатого скота выявлено 44 (12,4%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 8, с меньшей реакцией – 28, с равной реакцией – 8. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на КАМ.
Исследования в хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными микобактериями III и IV группы по классификации Раньена
В первом хозяйстве при исследовании 88 голов крупного рогатого скота выявлено 29 (32,9%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 5, с меньшей реакцией – 18, с равной реакцией – 5. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на КАМ.
Во втором хозяйстве при исследовании 179 голов КРС выявлено четыре реагирующих особи только на КАМ.
В третьем хозяйстве, при исследовании 103 голов крупного рогатого скота выявлено трое реагирующих только на КАМ.
В четвертом хозяйстве при исследовании 80 голов КРС выявлено пять реагирующих только на КАМ.
В пятом хозяйстве при исследовании 890 голов крупного рогатого скота выявлено 74 (8,3%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 6, с меньшей реакцией – 56, с равной реакцией – 12. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на КАМ.
В шестом хозяйстве при исследовании 1 327 голов крупного рогатого скота выявлено 92 (6,9%) реагирующих, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 6, с меньшей реакцией – 56, с равной реакцией – 12. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на КАМ.
В седьмом хозяйстве при исследовании 540 голов КРС выявлено 42 (7,7%) реагирующих особи, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 13, с меньшей реакцией – 21, с равной реакцией – 8. Результат симультанной пробы неопределенный.
В восьмом хозяйстве при исследовании 722 голов крупного рогатого скота выявлено 50 (6,9%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 31, с меньшей реакцией – 8, с равной реакцией – 11. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на ППД-туберкулин для млекопитающих.
В девятом хозяйстве при исследовании 2 980 голов КРС выявлено 74 (2,4%) реагирующих особи, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 13, с меньшей реакцией – 35, с равной реакцией – 6. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на КАМ.
В десятом хозяйстве при исследовании 128 голов КРС, выявлено восемь реагирующих животных только на КАМ.
В одиннадцатом хозяйстве при исследовании 1 749 голов крупного рогатого скота выявлено 105 (6%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 43, с меньшей реакцией – 43, с равной реакцией – 19. Результат симультанной пробы неопределенный.
В двенадцатом хозяйстве при исследовании 278 голов крупного рогатого скота выявлено 58 (20,8%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 3, с меньшей реакцией – 29, с равной реакцией – 27. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на КАМ.
В тринадцатом хозяйстве при исследовании 135 голов крупного рогатого скота выявлено 25 (18,5%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 4, с меньшей реакцией – 12, с равной реакцией – 9. Результат симультанной пробы неопределенный.
В четырнадцатом хозяйстве при исследовании 435 голов крупного рогатого скота выявлено 57 (13,1%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 17, с меньшей реакцией – 17, с равной реакцией – 21. Результат симультанной пробы неопределенный.
В пятнадцатом хозяйстве при исследовании 476 голов крупного рогатого скота выявлено 40 (8,4%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 13, с меньшей реакцией – 21, с равной реакцией – 4. Результат симультанной пробы неопределенный.
В шестнадцатом хозяйстве при исследовании 428 голов КРС выявлено 32 (7,4%) реагирующих особи, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 24, с меньшей реакцией – 5, с равной реакцией – 3. Результат симультанной пробы неопределенный.
В семнадцатом хозяйстве при исследовании 640 голов крупного рогатого скота выявлено 56 (8,7%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих – 25, с меньшей реакцией – 15, с равной реакцией – 16. Результат симультанной пробы неопределенный.
В восемнадцатом хозяйстве при исследовании 125 голов крупного рогатого скота выявлено 101 животное, реагирующие только на КАМ.
В девятнадцатом хозяйстве при исследовании 109 голов КРС выявлено семь животных, реагирующих только на КАМ.
В двадцатом хозяйстве при исследовании 55 голов крупного рогатого скота выявлено две особи, реагирующие только на КАМ.
Следует отметить, что список благополучных хозяйств, где мы применяли симультанную пробу с туберкулином и КАМ можно удвоить, но в этом нет необходимости, так как результаты исследований были примерно такими же.
Анализ полученных результатов показывает, что применение симультанной пробы с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ в благополучных по туберкулезу хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных микобактериями комплекса авиум-интрацеллюляре и нетуберкулезными микобактериями III и IV группы по Раньену, позволяет до 47,6% случаях дифференцировать неспецифические реакции по стаду животных.
Тем не менее, считаем, что главная диагностическая ценность симультанной пробы заключается в том, что при ее применении значительно сокращается количество реагирующих на туберкулин животных. Так, в благополучных хозяйствах, при исследовании реагирующих на туберкулин животных симультанной пробой с ППД-туберкулином для млекопитающих, как правило, многие реакции переходят на КАМ или превалируют на КАМ, то есть в конечном итоге «сужается поиск» особей для диагностического убоя, так как при применении симультанной пробы убою подлежат животные, более интенсивно реагирующие на туберкулин. При их отсутствии – реагирующие в равной степени на ППД-туберкулин для млекопитающих и КАМ.
К недостаткам симультанной пробы следует отнести небольшую эффективность. Так, по сообщениям некоторых авторов из разных регионов, применение симультанной пробы с ППД-туберкулином и КАМ позволяет дифференцировать неспецифические реакции от 0% до 77% случаях.
Кроме того, в соответствии с наставлениями, симультанная проба с ППД для млекопитающих и КАМ «является групповой и дает возможность ориентироваться в ситуации по туберкулезу лишь в целом по стаду или группе (не менее шести голов) исследуемых животных».
Проведенные нами многочисленные исследования по изучению возможности дифференциации неспецифических реакций на туберкулин показывают, что учет результатов симультанной пробы с ППД для млекопитающих и КАМ можно проводить по группе животных, а при получении неопределенных результатов исследований – необходимо проводить индивидуальный учет по каждой корове. В связи с тем, что в благополучных хозяйствах Российской Федерации, в основном, устанавливают сенсибилизацию крупного рогатого скота атипичными (нетуберкулезными) микобактериями, а сенсибилизация M. avium встречается относительно редко, для дифференциации неспецифических реакций предпочтительно применять симультанную пробу с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ.
Также считаем необходимым представить, какими стандартными методами проводят прижизненную диагностику туберкулеза крупного рогатого скота в странах Евросоюза. Так, в руководствах диагностических тестов и вакцинаций от 2000 г. и 2004 г. «Manual of Standards for Diagnostic Tests and Vaccines», 2000, «Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals», 2004, указано: внутрикожную туберкулиновую пробу проводят в области шеи или подхвостовой складки. Считается, что кожа в области шеи более чувствительна, чем в области подхвостовых складок. Учет результатов внутрикожной пробы проводят через 72 часа после введения туберкулина. В неблагополучных по туберкулезу стадах любая заметная или ощутимая припухлость в месте введения туберкулина считается положительной реакцией. В благополучных стадах отрицательная реакция – это утолщение кожной складки до 4 мм, без клинических признаков воспаления; положительная реакция – утолщение кожной складки более 4 мм или наличие утолщения кожной складки со всеми признаками воспаления (отек, экссудация, некроз, боль, воспаление местных лимфатических сосудов или лимфатических узлов).
Симультанную туберкулиновую пробу с применением ППД-туберкулина бычьего вида и ППД-туберкулина для птиц проводят на одной стороне шеи. При этом расстояние между двумя туберкулинами должно составлять 12-15 см. Телятам (в связи с недостаточностью места на одной стороне шеи) симультанную пробу рекомендуют проводить на симметричных участках шеи справа и слева.
ППД-туберкулин для млекопитающих и ППД-туберкулин для птиц вводят в дозе 2000 международных единиц (МЕ) в 0,2 мл.
Учет результатов симультанной пробы проводят через 72 часа после введения туберкулинов. Реакция считается положительной при увеличении кожной складки на ППД-туберкулин бычьего вида более 4 мм, чем на ППД-туберкулин для птиц. Сомнительная реакция – при увеличении кожной складки на 1-4 мм больше на ППД бычьего вида, чем на ППД для птиц. Отрицательная реакция – при равной реакции на туберкулины или при увеличении кожной складки на ППД бычьего вида меньше, чем на ППД-туберкулин для птиц.
Такая интерпретация результатов симультанной туберкулиновой пробы используется в странах Европейского Союза и рекомендуется в Директиве 64/432/ЕЕС. То есть, учет результатов симультанной пробы в странах ЕС проводится индивидуально по каждому исследованному животному.
В нашей стране приказом Департамента ветеринарии Министерства сельского хозяйства Российской Федерации №33 от 11.01.02 г. была создана комиссия в составе сотрудников Департамента ветеринарии, Курской биофабрики, ВГНКИ и ВИЭВ для проведения комиссионных исследований активности национального стандарта ППД-туберкулина для млекопитающих по отношению к международному стандарту PPD bovine.
В результате установлено, что при введении 0,2 мл стандартного раствора ППД-туберкулина для млекопитающих крупному рогатому скоту, доза введения составляет 10000 ТЕ ранее используемых туберкулиновых единиц активности, что эквивалентно величине туберкулиновой активности, выраженной в международных единицах – 2000 МЕ первого международного стандарта PPD bovine. То есть, диагностическая доза ППД-туберкулина для млекопитающих 10000 ТЕ соответствует активности 2000 МЕ международного стандарта для этого вида туберкулина.
В завершение публикации следует особо отметить, что при туберкулезе нет ни одного идеального метода диагностики. Поэтому диагностика туберкулеза должна быть комплексной. На современном этапе борьбы с этой древней и сложной инфекцией необходимо знать все особенности известных методов, и с учетом их достоинств и недостатков, а также подбора наиболее оптимальных, использовать разные комплексы диагностики: для благополучных хозяйств, для неблагополучных по туберкулезу хозяйств, для индивидуальных хозяйств частного сектора.
Для объективной оценки диагностической ценности и возможности применения в широкой ветеринарной практике утвержденных методов прижизненной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота считаем необходимым отметить все положительные и отрицательные качества каждого метода диагностики туберкулеза.
Внутрикожная проба – наиболее чувствительная и приемлемая для проведения массовых прижизненных диагностических исследований на туберкулез КРС. Тем более, что повсеместное применение безыгольных инъекторов значительно облегчает проведение этих исследований. Основным общеизвестным недостатком внутрикожной пробы является выявление неспецифических реакций.
Пальпебральная проба – по чувствительности уступает внутрикожной пробе, но намного превосходит глазную пробу. К недостаткам пальпебральной пробы следует отнести трудоемкость, так как необходима фиксация головы животного при введении туберкулина, некоторый субъективизм при оценке реакции (при незначительных, сомнительных реакциях). Преимущества: нет необходимости проводить выстрижку в месте введения туберкулина и фиксировать животных при учете реакции.
Глазная проба (офтальмопроба) – слабо чувствительная, трудоемкая и длительная (требуется 6-7 дней для выполнения), по сравнению с внутрикожной и пальпебральной пробами. Для нанесения 3-5 капель туберкулина на конъюнктиву нижнего века или поверхность роговицы глаза, необходима хорошая фиксация животного, причем голову особи необходимо вывернуть набок, чтобы исследуемый глаз был обращен вверх, что довольно сложно при проведении массовых исследований. Быков-производителей практически невозможно исследовать глазной пробой. Кроме того, при применении глазной пробы необходимо каждые три часа неоднократно проводить учет реакции (в том числе и в темное время суток).
Внутривенная проба – слабо чувствительная и наиболее трудоемкая, так как требуется фиксация животных, введение в яремную вену большой дозы туберкулина, неоднократное измерение температуры тела животного до и после введения туберкулина, то есть эту пробу нельзя использовать для массовых исследований.
Заключение
На современном этапе борьбы с туберкулезом животных, внутрикожная туберкулиновая проба является основным методом прижизненной диагностики данного заболевания крупного рогатого скота. При правильном и умелом ее использовании, в комплексе с другими дополнительными методами диагностики, внутрикожная проба в обозримом будущем будет оставаться основным методом прижизненной диагностики туберкулеза КРС.
Для дифференциации неспецифических реакций следует применять симультанную туберкулиновую пробу с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ, с учетом результатов исследований по группам животных и индивидуально по каждой корове.
Пальпебральную туберкулиновую пробу следует применять как дополнительный метод дифференциации неспецифических реакций на туберкулин и в целях отбора реагирующих животных для диагностического убоя. При этом реагирующими следует считать особей с положительными показаниями на обе пробы.
А.Х. Найманов, Всероссийский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р.Коваленко, г. Москва, Россия
